BD基质胶/基质膜

Corning® Matrigel® Basement Membrane Matrix, *LDEV-Free, 10mL (Product #354234)

Corning Matrigel matrix is a solubilized basement membrane preparation extracted from the Engelbreth-Holm-Swarm (EHS) mouse sarcoma, a tumor rich in extracellular matrix proteins, including Laminin (a major component), Collagen IV, heparin sulfate proteoglycans, entactin/nidogen, and a number of growth factors.

Quality
• Mouse colonies routinely screened for pathogens via Mouse Antibody Production (MAP) testing
• Extensive PCR testing is performed to screen for a number of pathogens• Tested and found negative for bacteria, fungi, and mycoplasma
• Protein concentrations determined by Lowry method
• Endotoxin units measured by Limulus Amoebocyte Lysate assay
• Matrigel Matrix gel stability tested for a period of 14 days at 37°C
• Biological activity determined for each lot using a neurite outgrowth assay.

Source
Engelbreth-Holm-Swarm Mouse Tumor

Preparation and Storage
Store at -20°C. Avoid multiple freeze-thaws.

操作指南 
BD采用专利技术，从富含胞外基质蛋白的EHS小鼠肿瘤中分离出BD Matrigel 基底膜基质，其主要成分由层粘连蛋白，Ⅳ型胶原，巢蛋白，硫酸肝素糖蛋白等组成，还包含生长因子和基质金属蛋白酶等。BD Matrigel基底膜基质在室温条件下，聚合形成具有生物学活性的三维基质，模拟体内细胞基底膜的结构、组成、物理特性和功能，有利于体外细胞的培养和分化，以及对细胞形态、生化功能、迁移、侵染和基因表达的研究。
BD Matrigel 基底膜基质形成的三维培养基质，可促进上皮细胞、肝细胞、Sertoli细胞、黑色素瘤细胞、血管内皮细胞、甲状腺细胞及毛囊细胞等的贴壁与分化。同时，Matrigel还能影响乳腺上皮细胞的蛋白表达，支持外周神经的新生和牛输卵管上皮细胞的分化。高浓度的Matrigel适用于研究体内血管生成和肿瘤细胞迁移及肿瘤模型的建立等。
产品特性
Matrigel基质会有色差变化（淡黄色到深红色），是由于酚红和碳酸氢盐与CO2作用引起的，但是与5％CO2平衡后色差即会减少。冻融后，轻轻摇晃试剂瓶使Matrigel分散均匀。所有操作均需在无菌环境下进行，试剂瓶瓶盖可用70％乙醇擦拭，并自然干燥。应使用预冷的移液器以保证Matrigel呈匀浆状。
细胞可在0.5mm厚度的Matrigel基质层表面生长，也可在1mm厚度的Matrigel三维基质内生长。过度稀释的Matrigel会形成非胶质的蛋白层，可以用于细胞贴壁，但不能用于细胞的分化研究。
注意：可将冻融后的Matrigel分装在多个小管，所有分装均需用预冷的冻存管，迅速冷冻并保存，避免多次冻融。
Matrigel在22-35℃温度环境下快速成胶，因此溶解时在4℃冰上过夜冻融（4度时会随着温度的上升部分成胶）。所有用品在使用前需置于冰浴，必须使用预冷的移液管、吸头及小管操作Matrigel。成胶后的Matrigel可以在4℃24－48小时后重新呈液态。
推荐包被与成胶方法 
注意：为了保证Matrigel基质膜的成胶性能与稳定性，稀释浓度不应低于1：3，可用无血清培养基稀释，Matrigel成胶后立即使用。
薄胶成胶方法： 
              1.冻融后，用预冷的移液枪头混匀Matrigel基质成匀浆状。
              2.将需要使用的培养板置于冰上，加入浓度为50μL/cm2生长面积的Matrigel基质。
              3.在37℃放置30分钟，即可使用。
厚胶成胶方法： 
              1.冻融后，用预冷的移液枪头混匀Matrigel基质成匀浆状。
              2.将需要使用的培养板置于冰浴，将培养的细胞与Matrigel基质混合，用移液枪头使其悬浮于基质中。加入浓度为150－200μL/cm2生长面积的Matrigel基质。
              3.在37℃放置30分钟，可成胶。可以加入细胞培养的基质，也可使细胞直接生长在胶表面。
薄层包被方法： 
              1.冻融后，用预冷的移液枪头混匀Matrigel基质成匀浆状。
              2.根据使用需要，采用无血清培养基稀释Matrigel基质。根据实验需要确定最佳包被浓度。
              3.将稀释的Matrigel基质包被于所需的培养器皿中，包被量至少覆盖整个器皿的生长表面。室温下孵育1小时。
              4.去除未结合的Matrigel，用无血清培养基轻轻地冲洗。