1、将冻存的细胞从液氮罐中取出，注意保护手和眼睛。

　　2、用 最快时间将小管的盖子拧松 1/4 以去除残留在螺纹处的液氮，然后将盖子盖紧。

　　3、将小管放入 37℃水浴中，轻轻握住并旋转，直到管内物体完全融化。

　　4、将小管立即从水浴中拿出，擦干，转入无菌环境。

　　5、用 75%的酒精冲洗小管，然后擦去多余酒精。

　　6、打开盖子，注意手指不要碰到里面的螺纹。用 1ml 离心管离心内容物。

　　7、平衡管内物，用多聚赖氨酸包被培养瓶(多数细胞用 T25 的培养瓶)。多数细胞类型推

　　荐接种密度为每平方厘米 5000 细胞。

　　8、盖好盖子，轻轻摇晃培养瓶以使细胞分布均匀。若需要气体交换可打开盖子。

　　9、将培养瓶放放培养箱中(37℃,5%CO2,95%空气)

　　10、植入培养后第 6-16 小时更换一次培养基以去除残留的二甲基亚枫和未贴壁的细胞。