流式技术服务（检测细胞、组织、血液等样本）

注意：上机流士检测费用。

需要客户提供抗体+染料+样本（如果是组织需要新鲜的，需要研磨提前告知）

如果需要我们检测中心提供抗体和染料另外收费

流式细胞仪是一种广泛使用的方法，用于分析细胞表面和细胞内分子的表达，表征和定义异种细胞群体中的不同细胞类型，评估分离的亚群的纯度以及分析细胞大小和体积。它允许同时对单个单元进行多参数分析。

它主要用于测量由荧光标记的抗体检测蛋白质或与特定细胞相关分子结合的配体（例如碘化丙啶与DNA结合）产生的荧光强度。

染色过程涉及从细胞培养物或组织样品中制备单细胞悬液。然后将细胞与未标记或荧光染料标记的抗体在试管或微量滴定板中孵育，并在流式细胞仪上进行分析。

样品制备

将 BSA 或 FBS 用作封闭剂，以最大程度减少非特异性结合。

使用不含 Ca/Mg++ 的缓冲液可防止阳离子依赖型细胞粘附。可以添加最高 5 mM 的 EDTA 防止细胞粘附。此情况下，由于未透析的 FBS 会取代 Ca/Mg++，因此应使用 BSA (0.1 – 1%) 或透析的 FBS (1 – 5%)。

若要研究细胞内标记物，可以使用低浓度的非离子型洗涤剂（最高 0.1%）透化细胞膜。

样品染色过程中，使用 10% 同源血清或 5 mg/mL 未标记 IgG 可最大程度避免抗体与 Fc-受体结合。

处理活细胞时，为防止细胞表面蛋白内化，所有步骤应在冰上进行。使用前将试剂保存在 4 °C 的环境。由于胰蛋白酶会诱导细胞表面蛋白的内化，需要采用温和的方法分离粘附细胞系。

加入 DNAse I (25 – 50 µg/mL) 和 5 mM MgCl₂ 可避免细胞死亡产生的团块。

获得单细胞悬液非常重要，可以避免系统堵塞。必要时，检测前用细胞滤网帽过滤样品。仅用尼龙网作最后过滤即可，否则系统会损失较多样品。

细胞浓度应维持在合理的范围 (1 x 106 – 10 x 106 细胞/mL)，浓度过高可能会堵塞系统并影响分离。

防止细胞损伤，应避免出现气泡、过度涡旋、更换缓冲液时吸出全部溶液、过度离心。